Fluorescens-antistofteknik til påvisning af en særlig bakterie i en prøve

Læs denne artikel for at lære om Princippet Fluorescens-Antistof Teknik til påvisning af en bestemt bakterie i en prøve!

Formålet med at lære princippet om immunofluorescens eller fluorescens-antistof teknik til påvisning af bestemte bakterier i en prøve.

Fluorescens-antistof eller immunofluorescens teknik er en hurtig og pålidelig procedure til påvisning af bestemte bakterier i en prøve. Et antal antistoffer mærket med fluorescerende farvestoffer, såsom fluoresceinisocyanat eller isothiocyanat, der er specifikke for bestemte bakterier, er tilgængelige.

Et af disse mærkede antistoffer, der er specifikke for de specifikke bakterier, der skal detekteres, tilsættes i dråber til et varmefast smear af den ukendte prøve af bakterier på et objektglas og spredes forsigtigt over overfladen af ​​smeden. Et fugtet filterpapir placeres inde i en petriskål.

Derefter placeres diaset inde i det på en U-formet glasstang og inkuberes ved 25 ° C i 35 minutter. Overskydende antistof på smøret vaskes væk med 1% phosphatbufret saltopløsning. Glideren er nedsænket i en Coplin-krukke indeholdende 1% phosphatpufret saltopløsning ved 25 ° C i 10 minutter. Glideren tørres af bibulous papir. En dråbe glycerol tilsættes til smøret. Den er dækket af et dækslip og undersøges under et fluorescensmikroskop.

Hvis bakterierne specifikke for det anvendte mærkede antistof er til stede i den ukendte bakterieeksempel, dannes et antigen-antistofkompleks (her er bakterier antigenet). Da antistoffet er mærket med et fluorescerende stof, udsender antigen-antistofkomplekset fluorescens, når det observeres under fluorescensmikroskop. Hvis bakterier, der er specifikke for antistoffet, er fraværende, vaskes det fluorescerende antistof væk, og fluorescens observeres ikke.